要攻克血栓性疾病，往往需要成功制備血栓動物模型為臨床和科研提供重要基礎(chǔ)。

根據(jù)血栓的位置，大致可分為血管內(nèi)血栓和心內(nèi)血栓。制備模型的實驗方法很多。它們的優(yōu)缺點是什么？近日，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外醫(yī)院的吳未淳、汪洋等在本刊中詳細(xì)闡述。

作者指出血栓動物模型的制備是基于血栓形成所需的條件和原理。

制備模型的首要考慮是實驗動物的選擇，包括羊、豬、狗、兔、大鼠和小鼠等。其中，大鼠和小鼠是最常用的血栓形成動物。

對于血管內(nèi)血栓形成模型，實驗室常用的有頸動脈、股動脈、腹主動脈、尾動脈、股靜脈、下腔靜脈、大腦中動脈。對于心內(nèi)血栓形成，左心室血栓形成更為常見。

血管內(nèi)血栓形成動物模型的制備

血管內(nèi)血栓動物模型主要包括動靜脈血栓。有兩種方法:物理傷害和化學(xué)傷害。

其中，物理性損傷是指通過一些損傷性的方法破壞血管內(nèi)膜，使皮下的膠原纖維暴露出來，從而激活血小板，釋放多種生物活性物質(zhì)，最終啟動內(nèi)源性和外源性凝血通路，引起血栓形成。

具體制備方法及注意事項如下:

機械損傷法:用刮匙、銀針等器械損傷血管內(nèi)膜；動靜脈血管是適用的；這種方法要注意破壞血管內(nèi)膜到一定深度，一般是幾毫米。

方法:將聚乙烯管、絲線或鋼絲環(huán)等異物置入血管腔內(nèi)。動靜脈血管是適用的。

結(jié)扎方法:根據(jù)不同的動物類型和實驗?zāi)康模Y(jié)扎的血管不同；動靜脈血管是適用的；這種方法簡單，重復(fù)性好，結(jié)扎靶血管只需幾個小時。

當(dāng)前損傷方法:適用于兩種動靜脈血管。

低溫?fù)p傷法:利用低溫加壓狀態(tài)減緩血液流動，操作簡單。

化學(xué)破壞法:經(jīng)過一些特殊的化學(xué)試劑(氯化鐵、卡拉膠、月桂酸鈉、胰蛋白酶、鏈霉蛋白酶、過氧化氫等。)被使用，內(nèi)膜被破壞形成血栓，不同化學(xué)物質(zhì)最終形成的血栓成分略有不同。

最常用的方法是氯化鐵血栓形成。這種方法簡單、可重復(fù)，最終的血栓結(jié)構(gòu)接近人類自發(fā)血栓。

光化學(xué)法也屬于化學(xué)傷害法。它最大的優(yōu)點是可以避免對血管的機械性損傷，可以快速形成血栓。血栓形成的原理更接近血栓形成的臨床機制，常用于腦血管病模型的制備。

心內(nèi)血栓形成動物模型的制備

國內(nèi)尚無相關(guān)文獻(xiàn)報道，但國外有少數(shù)學(xué)者提出了心內(nèi)血栓動物模型的制備方法，緊緊圍繞心血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、血流狀態(tài)改變、凝血增加三個條件進行制備。

心血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷:射頻消融產(chǎn)生的高熱可損傷內(nèi)皮細(xì)胞，引起心室和心房血栓形成。但這種方式造成的血栓大小不易控制，容易發(fā)生栓塞事件。

血流狀態(tài)的變化:低流量心臟狀態(tài)與心內(nèi)血栓形成密切相關(guān)，心臟驟停被認(rèn)為是最終的低流量狀態(tài)。有學(xué)者用豬心臟停搏模型形成左心室血栓。

但這種方法形成的急性血栓是不穩(wěn)定的，早期除顫或胸外按壓后幾分鐘就會溶解。另外，一旦功能恢復(fù)，可能會導(dǎo)致栓塞。

目前文獻(xiàn)報道的心內(nèi)血栓模型的常見制備方法是在心肌梗死模型的基礎(chǔ)上注射止血劑，然后制備心內(nèi)血栓或附壁血栓。

也有學(xué)者在結(jié)扎冠狀動脈心尖段使心肌梗死模型后，在心內(nèi)膜內(nèi)注射5%苯甲酸鈉和1 000單位凝血酶，最終形成左心室附壁血栓。

凝血功能增高:主要指遺傳性或獲得性原因引起的血液高凝狀態(tài)。

有學(xué)者用粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)誘導(dǎo)血液高凝狀態(tài)，引起小鼠左心室血栓形成。方法腹腔注射G-CSF后4周左右可觀察到左心室血栓形成，建立模型需要較長時間。